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嘉峪檢測網(wǎng) 2024-12-14 20:09
摘要：ICH M7“評估和控制藥物中 DNA反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)以限制潛在致癌風(fēng)險(xiǎn)”是一個(gè)關(guān)于藥物致突變雜質(zhì)的指導(dǎo)原則，旨在為致突變雜質(zhì)的鑒定、分類、定性和控制提供一個(gè)可行的框架方案，以控制其潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)。自ICH M7發(fā)布以來，關(guān)于DNA反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)的指導(dǎo)原則已在全球范圍內(nèi)獲得了大量的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)也提出了對該類雜質(zhì)的評估和控制做進(jìn)一步明確闡述的需求。ICH于2022 年5 月發(fā)布了ICH M7（R2）問答，該文件旨在為ICH M7 提供進(jìn)一步的明確和解釋，并對以下2 個(gè)方面促進(jìn)和提高一致性和協(xié)調(diào)性：評估和控制DNA反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)的考慮，藥品開發(fā)、上市許可申請和/或藥品主文件中應(yīng)提供的信息。介紹ICH M7（R2）問答文件的起草背景，對其進(jìn)行分析和解讀，并闡述非臨床審評關(guān)注點(diǎn)，以促進(jìn)業(yè)界對該文件的理解和運(yùn)用，以控制雜質(zhì)的潛在致癌性風(fēng)險(xiǎn)。
化學(xué)原料藥的合成涉及反應(yīng)物、試劑、溶劑、催化劑和其他加工助劑的使用。因化學(xué)反應(yīng)和終產(chǎn)物降解，所有原料藥及制劑中均存在雜質(zhì)。國際人用藥品注冊技術(shù)協(xié)調(diào)會（International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use，ICH）制定的指導(dǎo)原則"ICH Q3A（R2）：新原料藥中的雜質(zhì)"［1］和"ICHQ3B（R2）：新藥制劑中的雜質(zhì)"［2］為大多數(shù)雜質(zhì)的定性和控制提供了指導(dǎo)，但其對DNA反應(yīng)性雜質(zhì)的指導(dǎo)有限。"ICH M7：評估和控制藥物中DNA 反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)以限制潛在致癌風(fēng)險(xiǎn)"是關(guān)于致突變雜質(zhì)的鑒定、分類、定性和控制的指導(dǎo)原則，其最終目的是控制該類雜質(zhì)的潛在致癌性風(fēng)險(xiǎn)［3］。ICHM7 意在補(bǔ)充ICH Q3A（R2）、Q3B（R2）和ICHM3（R2）：支持藥物進(jìn)行臨床試驗(yàn)和上市的非臨床安全性研究指導(dǎo)原則［4］。
ICH M7 強(qiáng)調(diào)，為把致癌風(fēng)險(xiǎn)控制在可忽略的程度，制訂致突變雜質(zhì)的限度時(shí)，需同時(shí)兼顧安全性和質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)管理。ICH M7 考慮了用藥人群的具體情況，對原料藥或制劑中殘留或可能殘留的致突變雜質(zhì)進(jìn)行評估和控制給出了建議。ICH M7 于2014 年6 月5 日發(fā)布，ICH M7（R1）附錄于2017 年5月31 日發(fā)布，ICH M7（R2）及ICH M7（R2）附錄于2023 年4 月3 日發(fā)布，為現(xiàn)行版指導(dǎo)原則。中國藥品監(jiān)督管理局于2017 年加入ICH 后，ICH M7 指導(dǎo)原則已在中國實(shí)施。
自ICH M7 發(fā)布以來，關(guān)于DNA 反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)的指導(dǎo)原則已在全球范圍內(nèi)獲得了大量的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)也提出了對該類雜質(zhì)的評估和控制做進(jìn)一步明確闡述的需求。ICH 于2018 年啟動了ICH M7（R2）問答的起草工作，并于2022 年5 月24日正式發(fā)布。ICH M7（R2）問答文件［5］旨在為ICHM7 提供進(jìn)一步的明確和解釋，并對以下2 個(gè)方面促進(jìn)和提高一致性和協(xié)調(diào)性：評估和控制DNA 反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)的考慮，藥品開發(fā)、上市許可申請和/或藥品主文件中應(yīng)提供的信息。本文介紹ICHM7（R2）問答的起草背景，對其進(jìn)行介紹和解讀，并闡述與ICH M7 相關(guān)的非臨床研究關(guān)注點(diǎn)，以促進(jìn)藥品研發(fā)企業(yè)理解和運(yùn)用該指導(dǎo)原則，控制藥品雜質(zhì)的致癌性風(fēng)險(xiǎn)。
1、 ICH M7（R2）問答的起草背景
ICH M7 自2014 年發(fā)布實(shí)施以來，對于研究和識別致突變雜質(zhì)的潛在致癌性風(fēng)險(xiǎn)起到了很好的指導(dǎo)作用，但在指導(dǎo)原則的實(shí)施過程中也陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一些問題。ICH在2018 年3 月啟動了M7 的維護(hù)修訂計(jì)劃。目前，M7 已更新的主要內(nèi)容包括：（1）新增問答（Q&A）文件。（2）對ICH M7（R1）注釋第7項(xiàng)下的內(nèi)容進(jìn)行修訂：由于臨床治療技術(shù)的進(jìn)步，M7（R2）將艾滋?。℉IV）患者的生存期從1～10 年修改為＞10 年，同時(shí)相應(yīng)地提高了雜質(zhì)限度要求（問答文件中有專題闡述）。（3）在已有的M7（R1）14 個(gè)雜質(zhì)安全性各論的基礎(chǔ)上，增加了7 個(gè)新的致突變雜質(zhì)的安全性各論，相應(yīng)地給出了21 個(gè)雜質(zhì)的安全性限度。
2020 年6 月29 日ICH M7（R2）問答文件完成第2 階段，上網(wǎng)公開征求意見。在征求意見中，業(yè)界反饋了超過100 個(gè)問題，在第3 階段專家工作組（EWG）進(jìn)行了詳細(xì)討論。2022 年5 月24 日，ICHM7（R2）問答文件在第4 階段獲得ICH 大會批準(zhǔn)。2023 年4 月3 日，ICH M7（R2）在第4 階段獲得ICH大會批準(zhǔn)。2023 年5 月24 日，針對第12 頁中抗HIV藥品致突變雜質(zhì)限度的實(shí)施時(shí)間進(jìn)行糾錯(cuò)，由ICHM7（R2）問答進(jìn)入第4 階段之日起18 個(gè)月后實(shí)施，更改為M7（R2）進(jìn)入第4 階段之日起18 個(gè)月后實(shí)施。2024 年1 月3 日，國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布公告，M7（R2）指導(dǎo)原則正文、問答及附錄即日起在我國正式實(shí)施［6］。
2、 ICH M7（R2）問答文件的主要內(nèi)容
與ICH 其他問答文件一致，ICH M7（R2）問答文件主要以問答的形式為ICH M7 正文提供進(jìn)一步的明確和解釋。該文件分為前言和25 個(gè)問答，對正文的11 個(gè)章節(jié)中的引言、指導(dǎo)原則的適用范圍、總則、已上市藥品的注意事項(xiàng)、危害評估因素、風(fēng)險(xiǎn)表征、控制策略和文件8 個(gè)章節(jié)的部分內(nèi)容進(jìn)行了明確和解釋。下文分章節(jié)介紹和解讀其中的內(nèi)容，為方便ICH M7（R2）問答的原文進(jìn)行對照閱讀，以下部分在問題序號后同時(shí)標(biāo)注該問答文件的原序號。
2.1 引言
引言部分有4 個(gè)問答。
問題1（問答文件1.1）：正文注釋1 闡述了ICHM7 與ICH Q3A和Q3B之間關(guān)系，其中2 個(gè)術(shù)語“潛在致突變性”和“潛在遺傳毒性”容易混淆，這2 個(gè)術(shù)語是否可以互換？回答：這2 個(gè)術(shù)語不可以互換。潛在致突變性是指化合物誘發(fā)點(diǎn)突變的能力［即由細(xì)菌回復(fù)突變（Ames）試驗(yàn)檢測］，而潛在遺傳毒性指致突變性、致染色體斷裂或誘導(dǎo)多倍體形成的潛力。ICH M7 特別關(guān)注致突變性。
問題2（問答文件1.2）：對于日攝入量（TDI）≤1 mg的雜質(zhì)，如何評估該雜質(zhì)的潛在致突變性？回答：在ICH M7 中，對TDI≤1 mg 的雜質(zhì)，（定量）構(gòu)-效關(guān)系［（Q）SAR］是初步評估潛在致突變性的適當(dāng)方法。當(dāng)鑒定存在警示結(jié)構(gòu)時(shí)，可以進(jìn)行一個(gè)追加體外評估（例如Ames 試驗(yàn)），或者采用毒理學(xué)關(guān)注閾值（TTC）來控制雜質(zhì)。無論哪種評估得出陰性結(jié)果均可將雜質(zhì)歸為第5 類。Ames 試驗(yàn)的結(jié)果權(quán)重高于（Q）SAR 的預(yù)測結(jié)果。此外，建議通過（Q）SAR預(yù)測進(jìn)行警示結(jié)構(gòu)評估，不應(yīng)僅憑“目測”評估得出無警示結(jié)構(gòu)結(jié)果就將雜質(zhì)歸為第5 類。
問題3（問答文件1.3）：對于TDI 超過1 mg 的雜質(zhì)，致突變性如何評估？回答：根據(jù)ICH M7 注釋1所述，1 mg 是指雜質(zhì)的絕對量，與ICH Q3A/B 中的鑒定限度或界定限度沒有對應(yīng)關(guān)系。對于需長期服用的藥物，如果一個(gè)雜質(zhì)的TDI超過1 mg，同時(shí)在2個(gè)適當(dāng)?shù)模≦）SAR 系統(tǒng)中均為陰性預(yù)測結(jié)果，則可以需要考慮開展最低篩選的遺傳毒性試驗(yàn)（點(diǎn)突變和染色體畸變）。
問題4（問答文件1.4）：如果某種雜質(zhì)在2 個(gè)適當(dāng)?shù)模≦）SAR 系統(tǒng)中均為陰性預(yù)測結(jié)果，并且TDI低于或等于1 mg，是否仍建議進(jìn)行進(jìn)一步的遺傳毒性試驗(yàn)？回答：不建議，如果某種雜質(zhì)在2 個(gè)適當(dāng)?shù)模≦）SAR 系統(tǒng)中均為陰性預(yù)測結(jié)果，并且TDI≤1 mg，無需進(jìn)行進(jìn)一步遺傳毒性試驗(yàn)。
解讀：引言部分的4 個(gè)問答，主要是關(guān)于遺傳毒性和致突變毒性的關(guān)系以及雜質(zhì)TDI 是否超過1 mg 或不超過1 mg 的不同評估策略。我國之前業(yè)界對于M7 所關(guān)注的雜質(zhì)曾稱之為“遺傳毒性雜質(zhì)”和“基因毒性雜質(zhì)”等，這次明確了M7 關(guān)注的是“致突變”雜質(zhì)，即能與DNA 反應(yīng)的雜質(zhì)，可通過體外Ames 試驗(yàn)檢測。另外，本問答文件還明確了對于TDI 超過1 mg 的雜質(zhì)，如果2 種（Q）SAR 系統(tǒng)預(yù)測為陰性，可能需要考慮開展最低篩選的遺傳毒性試驗(yàn)（點(diǎn)突變和染色體畸變），這也是ICH Q3A/B的要求，因?yàn)門DI 超過1 mg，超過了ICH Q3A/B界定限，可能需要進(jìn)行界定。
2.2 指導(dǎo)原則的適用范圍
指導(dǎo)原則的適用范圍部分有1 個(gè)問答。
問題（問答文件2.1）：半合成的原料藥和制劑是否包含在ICH M7 的適用范圍內(nèi)？回答：是，在某些情況。如果如ICH Q11 所定義的半合成原料藥的生產(chǎn)步驟可能引入致突變雜質(zhì)或降解產(chǎn)物（如發(fā)酵產(chǎn)品的后修飾或連接子的后期引入），則需要進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估。在半合成的原料藥和制劑的生產(chǎn)過程中使用以下化合物應(yīng)視為包含在ICH M7 的應(yīng)用范圍內(nèi)：化學(xué)合成的中間體和其中實(shí)際存在的雜質(zhì)和試劑。
解讀：關(guān)于ICH M7 適用范圍，適用于化藥原料藥和制劑，不適用于生物制品、肽類、寡核苷酸、放射性藥物、發(fā)酵產(chǎn)品、草藥、動物或植物來源的粗制品；也不適用于ICH S9 所涉及的擬用于晚期癌癥適應(yīng)證的原料藥和制劑。另外，某些情況下擬用于其他適應(yīng)證的原料藥本身在治療濃度下就存在遺傳毒性，且預(yù)測可能會增加致癌風(fēng)險(xiǎn)，在這些情況下，暴露于致突變雜質(zhì)不會顯著增加原料藥的致癌風(fēng)險(xiǎn)，因此，雜質(zhì)可以按非致突變雜質(zhì)進(jìn)行控制。
2.3 總則
總則部分有2 個(gè)問答。
問題1（問答文件3.1）：非致突變的致癌性雜質(zhì)是否應(yīng)按照ICH M7 進(jìn)行控制？回答：否，在Ames試驗(yàn)中呈陰性的致癌物不通過DNA反應(yīng)性機(jī)制致癌（如乙酰胺和羥胺），因此不適用于ICH M7 指導(dǎo)原則。
問題2（問答文件3.2）：致突變的非致癌性雜質(zhì)是否應(yīng)按照ICH M7 進(jìn)行控制？回答：否，對于在適當(dāng)且良好開展的動物實(shí)驗(yàn)中被證明無致癌性的致突變物，將歸為第5 類雜質(zhì)。
解讀：致突變性和致癌性不是互為必然的因果關(guān)系，對于Ames 試驗(yàn)為陰性的致癌物不通過DNA反應(yīng)性機(jī)制致癌，不適用于M7。另外，對于Ames試驗(yàn)為陽性，適當(dāng)且良好開展的體內(nèi)致突變試驗(yàn)［其試驗(yàn)需滿足ICH M7（R2）注釋3 的要求］結(jié)果為陰性，或者適當(dāng)且良好開展的致癌性試驗(yàn)結(jié)果為陰性，方可將雜質(zhì)歸為5 類。
2.4 已上市藥品的注意事項(xiàng)
已上市藥品的注意事項(xiàng)部分有1 個(gè)問答。
問題（問答文件4.1）：ICH M7 正文中“4.3 已上市藥品的臨床使用變更”中“臨床使用劑量的顯著增加”是什么意思？回答：如果活性藥物成分（API）劑量的增加可能導(dǎo)致任何致突變雜質(zhì)的水平超過可接受限度，則視為顯著增加（見ICH M7 正文的表2 和表3 以及附錄）。在這種情況下，建議重新評估致突變雜質(zhì)的限度。
解讀：在這一條中的“顯著增加”不是指統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異和純粹數(shù)量上增加的倍數(shù)，而是指劑量增加是否導(dǎo)致攝入的致突變雜質(zhì)超過可接受限度。
2.5 危害評估因素
危害評估因素部分有4 個(gè)問答。
問題1（問答文件6.1）：應(yīng)向監(jiān)管機(jī)構(gòu)提供哪些資料和/或文件，以充分證明內(nèi)部開發(fā)或非通用的（Q）SAR模型的有效性？回答：ICH M7 第6 節(jié)指出：“（Q）SAR模型采用的這些預(yù)測方法學(xué)應(yīng)遵循經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（the Organization for Economic Co-operation and Development，OECD）制訂的一般驗(yàn)證原則［OECD Validation，2007］［7］。
在ICH M7 中，OECD 的（Q）SAR 驗(yàn)證原則為：（1）確定的終點(diǎn)——該模型應(yīng)采用參照OECD標(biāo)準(zhǔn)方案開展的體外細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)生成的試驗(yàn)數(shù)據(jù)來進(jìn)行訓(xùn)練。（2）明確的算法——用于構(gòu)建模型的算法應(yīng)公開。應(yīng)該明確該模型是基于統(tǒng)計(jì)規(guī)則（通過機(jī)器學(xué)習(xí)進(jìn)行構(gòu)建）還是專家規(guī)則（根據(jù)源于專家的知識進(jìn)行構(gòu)建）。（3）確定的應(yīng)用域——應(yīng)描述受試化合物是否在模型的應(yīng)用域內(nèi)，以及該應(yīng)用域如何計(jì)算。當(dāng)該模型沒有足夠的信息足以對化合物做出可靠的預(yù)測時(shí)，應(yīng)向用戶發(fā)出警示。（4）模型的擬合度、耐用性和可預(yù)測性的適當(dāng)評估——應(yīng)對模型進(jìn)行評估且證明其可充分預(yù)測細(xì)菌回復(fù)突變。應(yīng)采用的標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證技術(shù)包括“召回率”（recall）、交叉驗(yàn)證和外部驗(yàn)證。還應(yīng)提供該模型無過度擬合的證據(jù)。（5）機(jī)制解釋——是否有足夠的信息對相關(guān)的機(jī)制進(jìn)行評估（如特定描述符）。
對于任何內(nèi)部開發(fā)或非通用的系統(tǒng)，作為證明每個(gè)模型如何遵循以上這些原則，并了解（Q）SAR模型是如何開發(fā)和驗(yàn)證的最低要求，根據(jù)監(jiān)管機(jī)構(gòu)的要求，申請人需提交OECD（Q）SAR 模型報(bào)告格式（QMRF）［OCED QMRF，2017］［8］。該QMRF 模板總結(jié)并報(bào)告了關(guān)于（Q）SAR 模型的關(guān)鍵信息，其中包括所有驗(yàn)證研究的結(jié)果以及關(guān)于模型針對給定化合物的適用性的補(bǔ)充信息。監(jiān)管機(jī)構(gòu)可以根據(jù)各自對特定模型的經(jīng)驗(yàn)要求申請人提供這些信息。
問題2（問答文件6.2）：如ICH M7 中所述，采用2 個(gè)（Q）SAR 模型之一獲得了超出應(yīng)用域或非覆蓋范圍的結(jié)果時(shí)，雜質(zhì)可否歸為第5 類？回答：否，從2種（Q）SAR模型之一獲取了超出應(yīng)用域或非覆蓋范圍的結(jié)果時(shí)，還需要進(jìn)行額外的評估才能將該化合物歸為第5 類雜質(zhì)。
鑒于已對化學(xué)結(jié)構(gòu)和DNA反應(yīng)性之間的關(guān)系有了充分理解，因此具有潛在致突變性的結(jié)構(gòu)不太可能出現(xiàn)超出“應(yīng)用域”的情況。然而，專家評價(jià)可進(jìn)一步確保是否可以將此類雜質(zhì)歸為第5 類。專家評價(jià)可能包括采用以下1 項(xiàng)或多項(xiàng)內(nèi)容［9］：（1）與具有細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)數(shù)據(jù)、且結(jié)構(gòu)相似的類似物進(jìn)行比較（交叉參照法）。（2）由專家對化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行評價(jià)以確定該化合物是否具有DNA反應(yīng)性。（3）采用相同方法（如基于專家規(guī)則或統(tǒng)計(jì)規(guī)則）的其他經(jīng)驗(yàn)證的（Q）SAR（參見本節(jié)問題1 即原文件6.1）模型輸出結(jié)果，該結(jié)果應(yīng)在其應(yīng)用范圍內(nèi)。
問題3（問答文件6.3）：如果雜質(zhì)在Ames 試驗(yàn)中呈陰性，而在染色體斷裂性試驗(yàn)（如染色體畸變試驗(yàn)）中呈陽性，如何按照ICH M7 分類系統(tǒng)對該雜質(zhì)進(jìn)行分類？回答：如果雜質(zhì)在Ames 試驗(yàn)中呈陰性，則視為第5 類雜質(zhì)。ICH M7 不適用于在染色體斷裂性試驗(yàn)中呈陽性的雜質(zhì)。
問題4（問答文件6.4）：請明確注釋3 中所列試驗(yàn)作為體外致突變性的體內(nèi)相關(guān)性的追加試驗(yàn)的理由?；卮穑喝绻粋€(gè)雜質(zhì)在Ames 試驗(yàn)中呈陽性，且該雜質(zhì)水平無法控制在適當(dāng)?shù)目山邮芟薅葍?nèi)，則可以追加一個(gè)包含致突變終點(diǎn)（致突變性）的體內(nèi)試驗(yàn)。在提供科學(xué)合理性依據(jù)（如注釋3 所示）以支持其應(yīng)用的情況下，也可接受進(jìn)行注釋3 中所述的其他追加試驗(yàn)（表1）。對于上述任何1 項(xiàng)試驗(yàn)，應(yīng)按照ICH S2 證明暴露充分。
解讀：由于2 種互補(bǔ)的（Q）SAR模型（基于統(tǒng)計(jì)規(guī)則和專家規(guī)則）預(yù)測均為陰性結(jié)果，則無需進(jìn)一步試驗(yàn)即可歸為第5 類雜質(zhì)，如果出現(xiàn)假陰性結(jié)果則會出現(xiàn)大的風(fēng)險(xiǎn)，因此對（Q）SAR 模型的要求非常高。對于任何非通用的（Q）SAR模型有嚴(yán)格的要求，其采用的預(yù)測方法學(xué)應(yīng)遵循OECD制訂的一般驗(yàn)證原則。在采用兩種認(rèn)可的（Q）SAR模型進(jìn)行預(yù)測時(shí)，需關(guān)注其預(yù)測結(jié)果是否可靠，若其中一種得到超出應(yīng)用域或在非覆蓋范圍的結(jié)果時(shí)，則需進(jìn)行額外評估中，如采用能達(dá)到要求的專家評價(jià)、進(jìn)行Ames 試驗(yàn)、進(jìn)行合適的以致突變作為終點(diǎn)的體內(nèi)試驗(yàn)等。以體內(nèi)試驗(yàn)作為證明Ames 試驗(yàn)陽性結(jié)果無體內(nèi)相關(guān)性時(shí)，需根據(jù)其Ames 試驗(yàn)陽性結(jié)果的情況選擇適當(dāng)?shù)脑囼?yàn)。在什么條件下選擇何種體內(nèi)試驗(yàn)詳見ICH M7（R2）的注釋3（表1），而且該體內(nèi)試驗(yàn)必須按照ICH S2 指導(dǎo)原則的要求證明體內(nèi)暴露充分，才認(rèn)可體內(nèi)陰性結(jié)果。
2.6 風(fēng)險(xiǎn)表征
風(fēng)險(xiǎn)表征部分有5 個(gè)問答。
問題1（問答文件7.1）：如果Ames 試驗(yàn)結(jié)果呈陽性的雜質(zhì)隨后在適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)試驗(yàn)中進(jìn)行了檢測，且結(jié)果明確為陰性，是否足以證明無體內(nèi)相關(guān)性？回答：是。一項(xiàng)良好開展且科學(xué)合理的體內(nèi)試驗(yàn)（見2.5 問題4 即原文件6.4），足以證明無體內(nèi)相關(guān)性。如果體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果為陰性，該雜質(zhì)可歸為ICH M7 分類的第5 類。
問題2（問答文件7.2）：如果一個(gè)Ames 試驗(yàn)結(jié)果陽性的雜質(zhì)無法控制在可接受限度內(nèi)，隨后在一個(gè)適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)試驗(yàn)中進(jìn)行了檢測且結(jié)果為陽性，是否支持設(shè)置化合物特定雜質(zhì)限度？回答：如果一個(gè)致突變雜質(zhì)不能按照TTC（或短于基于生命周期的限度）進(jìn)行控制，來自于一個(gè)適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果可以用于補(bǔ)充證據(jù)權(quán)重法的已有數(shù)據(jù)，來支持一個(gè)基于具體問題具體分析的更高的限度。然而，單獨(dú)的體內(nèi)基因突變試驗(yàn)?zāi)壳斑€不能直接評估癌癥風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)槠浣K點(diǎn)是致突變而不是致癌性（即它們被用于危害識別）。
問題3（問答文件7.3）：短于終生（LTL）方法是否可應(yīng)用于可接受攝入量（AI）或每日允許暴露量（PDE），使用ICH M7 正文表2 所示的相同比例？回答：ICH認(rèn)為LTL 方法可以應(yīng)用于基于TTC 或特定化合物/類別AI 設(shè)置暴露限度的化合物。然而，此方法并不適用于PDE，因?yàn)閷τ陂撝迪嚓P(guān)機(jī)制，給藥時(shí)長反應(yīng)的線性尚未得到充分證明。對于短期暴露（30 d 或更短），更高的暴露水平根據(jù)具體情況也可能被接受。
問題4（問答文件7.4）：為什么在臨床使用情形表中將HIV 疾病轉(zhuǎn)移至“服藥時(shí)長＞10 年至終生”類？該變更應(yīng)如何實(shí)施？回答：由于HIV疾病臨床治療的進(jìn)展，療程類別也發(fā)生了變化。為了避免已上市HIV藥物的供應(yīng)中斷，此變更將不適用于目前已上市的產(chǎn)品。例如，對于新的原料藥供應(yīng)商，如果該供應(yīng)商使用相同的合成路線生產(chǎn)的原料藥是該特定區(qū)域內(nèi)銷售的現(xiàn)有上市制劑的組分，則可接受攝入量仍為10 μg·d−（1 見ICH M7第4.1節(jié)）。
對于ICH M7（R2）進(jìn)入第4 階段之日起18 個(gè)月后提交的HIV治療相關(guān)藥物注冊申請，在以下情況下將采用1.5 μg·d−1 或其他適當(dāng)?shù)目山邮軘z入量：（1）處于臨床開發(fā)和后續(xù)上市申請階段的新原料藥和新制劑；（2）原料藥合成的變更導(dǎo)致產(chǎn)生新雜質(zhì)或現(xiàn)有雜質(zhì)的可接受標(biāo)準(zhǔn)放寬；（3）處方、組分或生產(chǎn)工藝的變更導(dǎo)致產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物或已有降解產(chǎn)物的可接受標(biāo)準(zhǔn)放寬；（4）通過藥物主文件（DMF）引入新來源的原料藥，而該DMF 持有者在相關(guān)區(qū)域內(nèi)無既往批準(zhǔn)的DMF；（5）如ICH M7 第4.1 節(jié)所述的特定合成步驟的變更；（6）如ICH M7第4.4 節(jié)所述的新發(fā)現(xiàn)的第1 類或第2 類雜質(zhì)、關(guān)注隊(duì)列中的結(jié)構(gòu)或相關(guān)雜質(zhì)的新的危害性數(shù)據(jù)。
問題5（問答文件7.5）：當(dāng)原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中確定了3 種或3 種以上的第2 類或第3 類雜質(zhì)時(shí)，“表2：單個(gè)雜質(zhì)的可接受攝入量”是否適用？回答：適用。在這種情況下，應(yīng)按照表2 中的限度，在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中列出各“單個(gè)雜質(zhì)”的限度（例如對于＞10 年至終生的情況，不得超過1.5 μg·d−1）。此外，應(yīng)按照表3 中的限度，在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中列出“總致突變雜質(zhì)”的限度（例如對于＞10年至終生的情況，不得超過5 μg·d−1）。如指導(dǎo)原則中所述，化合物特異性或類別相關(guān)的可接受限度（1 類）和在制劑中形成的降解產(chǎn)物不包含在總致突變雜質(zhì)限度中。
解讀：關(guān)于體外致突變（Ames 試驗(yàn)）試驗(yàn)結(jié)果為陽性，一般按TTC 控制雜質(zhì)限度，如果不能按TTC控制，來自于一個(gè)適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果可以用于補(bǔ)充證據(jù)權(quán)重法的已有數(shù)據(jù)，來支持一個(gè)更高的限度，該限度應(yīng)基于具體問題具體分析原則確定。但是體內(nèi)致突變試驗(yàn)結(jié)果只是用于致癌性風(fēng)險(xiǎn)識別，而不能定量用于致癌性風(fēng)險(xiǎn)評估，所以不能用該數(shù)據(jù)直接計(jì)算AI。
對于HIV藥物的調(diào)整，由于近年來對于HIV治療取得了較大的進(jìn)展，目前的治療方法已大幅度提高患者的生存年限，所以把該類藥物服藥時(shí)長由1～10 年類提高到＞10 年至終生類并收緊雜質(zhì)的可接受限度是科學(xué)合理的。從患者用藥角度出發(fā)，為了避免已上市HIV藥物的供應(yīng)中斷，此變更將不適用于目前已上市的產(chǎn)品。但是對于ICH M7（R2）進(jìn)入第4 階段之日起18 個(gè)月后提交的注冊申請均適用于新的標(biāo)準(zhǔn)。
2.7 控制策略
控制策略部分有6 個(gè)問答。
問題1（問答文件8.1）：什么時(shí)候適合采用方法4 的控制策略？回答：當(dāng)某種致突變雜質(zhì)在最終原料藥中存在的風(fēng)險(xiǎn)可忽略不計(jì)時(shí)，可采用方法4。如果基于科學(xué)原理（如雜質(zhì)反應(yīng)性或溶解度）的預(yù)測性清除計(jì)算產(chǎn)生的雜質(zhì)水平低于TTC或AI 的1%時(shí)，則可認(rèn)為風(fēng)險(xiǎn)可忽略不計(jì)。如果根據(jù)預(yù)測性清除計(jì)算產(chǎn)生的雜質(zhì)水平大于或等于TTC或AI 的1%時(shí)，則應(yīng)提供顯示雜質(zhì)水平低于TTC 或AI 的10%的實(shí)測清除因子（即摻雜和清除數(shù)據(jù)），以證明采用方法4 的合理性。在進(jìn)行清除計(jì)算和生成分析數(shù)據(jù)時(shí)，應(yīng)考慮與工藝相關(guān)的條件。監(jiān)管機(jī)構(gòu)將基于具體問題具體分析原則評估方法4 的可接受性，包括要求提供額外的支持性數(shù)據(jù)。對于最后一步引入的雜質(zhì)也參見本節(jié)下文中的問題3（原文件8.3）。
問題2（問答文件8.2）：將預(yù)測性清除計(jì)算用于方法4 控制時(shí)，應(yīng)考慮哪些因素？回答：當(dāng)對方法4控制使用預(yù)測性清除計(jì)算時(shí)，應(yīng)考慮以下因素：（1）預(yù)測性清除計(jì)算應(yīng)基于申請中所述的原料藥生產(chǎn)工藝，并應(yīng)考慮每一步驟中雜質(zhì)的反應(yīng)性、溶解度、揮發(fā)性和其他因素。預(yù)測性清除計(jì)算應(yīng)采用保守的數(shù)值與方法，因?yàn)轭A(yù)測性清除通常不依賴于實(shí)驗(yàn)性確證。文獻(xiàn)報(bào)道［10-11］描述了基于科學(xué)原理的預(yù)測性清除計(jì)算方法示例?？苫谖墨I(xiàn)或軟件進(jìn)行預(yù)測性清除計(jì)算。（2）用于證明預(yù)測性清除計(jì)算合理性的信息匯總（即雜質(zhì)反應(yīng)性或溶解度數(shù)據(jù)、工藝相關(guān)條件下的摻雜和清除數(shù)據(jù)）應(yīng)以生產(chǎn)工藝知識、最終原料藥的風(fēng)險(xiǎn)以及藥物開發(fā)階段為指導(dǎo)。（3）在申請中提交的預(yù)測性清除計(jì)算的合理性依據(jù)，可包括從高水平總結(jié)到關(guān)于計(jì)算的詳細(xì)信息（如單個(gè)清除因子的科學(xué)依據(jù)）以及其他支持性資料。當(dāng)原料藥中的預(yù)測雜質(zhì)水平接近TTC 或AI時(shí)，宜提供更詳細(xì)的關(guān)于計(jì)算的資料。即使當(dāng)時(shí)未提交，也應(yīng)在要求時(shí)提供有關(guān)如何推導(dǎo)得出各清除因子的資料。
問題3（問答文件8.3）：第8.2 節(jié)“控制方法的注意事項(xiàng)”中“對于在最終合成步驟中引入的雜質(zhì)，除另有合理性依據(jù)外，一般采用方法1 的控制方法”是什么意思？回答：對于在最終合成步驟中引入或生成的致突變雜質(zhì)，鑒于接近于最終產(chǎn)品，因此方法1是首選的控制策略。然而，當(dāng)有合理性依據(jù)時(shí)，也可以使用方法2 和3 的控制策略?？刂撇呗赃x擇的因素也可能受到包括后續(xù)重結(jié)晶步驟的存在、高效的純化方法（如色譜法、定義明確的結(jié)晶法）、雜質(zhì)的反應(yīng)性（例如高反應(yīng)性試劑，如二氯亞砜）、雜質(zhì)的物理性質(zhì)（例如低沸點(diǎn)，如甲基氯）以及可用的數(shù)據(jù)（支持清除評估的分析數(shù)據(jù)）。在大多數(shù)情況下，對于在最后一個(gè)合成步驟引入或生成的致突變雜質(zhì)，僅提供基于預(yù)測性的方法4 控制策略的合理性依據(jù)是不夠的，應(yīng)提供支持性分析數(shù)據(jù)（參見本節(jié)問答1 即原文件8.2）。
問題4（問答文件8.4）：方法2 和3 控制策略是否允許進(jìn)行定期確認(rèn)性檢驗(yàn)（即跨批檢驗(yàn)）？回答：否。定期確認(rèn)性檢驗(yàn)不適用于方法2 和3 控制策略。在ICH M7 第8.1 節(jié)中，僅將定期確認(rèn)性檢驗(yàn)作為方法1 的一種控制策略進(jìn)行討論。方法1 的定期確認(rèn)性檢驗(yàn)策略的制定可參考ICH Q6A。方法1 的定期確認(rèn)性檢驗(yàn)概念（根據(jù)ICH Q6A）通常應(yīng)在批準(zhǔn)后實(shí)施，并適用于最終原料藥的檢驗(yàn)。
問題5（問答文件8.5）：如果一種致突變雜質(zhì)在原料藥中的檢測數(shù)據(jù)在多個(gè)批次中始終＜TTC 的30%或AI 的30%，是否足以支持在控制策略中不對該雜質(zhì)進(jìn)行檢測的合理性？回答：否。僅憑批次數(shù)據(jù)證明致突變雜質(zhì)始終＜TTC 的30%或AI 的30%不足以支持采用方法4 控制策略。然而，如果原料藥中該雜質(zhì)存在的風(fēng)險(xiǎn)可忽略不計(jì)，并具有適當(dāng)?shù)暮侠硇砸罁?jù)，可考慮方法4 控制策略。關(guān)于支持方法4 控制策略的建議，參見本節(jié)問答1 和2（原文件8.1 和8.2）。
問題6（問答文件8.6）：在生成分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以支持方法3 和4 控制策略時(shí)，對于生產(chǎn)規(guī)模如何考慮？回答：當(dāng)產(chǎn)生實(shí)測的清除因子或確定中間過程控制點(diǎn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的試驗(yàn)通常足夠。這些試驗(yàn)應(yīng)采用代表申請中所述的最終工藝，并應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)環(huán)境之間的規(guī)模和設(shè)備相關(guān)差異的潛在影響（如非均相系統(tǒng)中混合對雜質(zhì)水平的影響、液-液相分離的質(zhì)量等）。在觀察到規(guī)模依賴性的情況下，建議對以中試規(guī)?；蛏虡I(yè)規(guī)模生產(chǎn)的批次進(jìn)行確認(rèn)性檢驗(yàn)。對中試規(guī)?；蛏虡I(yè)規(guī)模的摻雜試驗(yàn)不做要求。
解讀：在ICH M7 正文控制策略中，給出了4 種控制方法：方法1：原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中包含雜質(zhì)檢查項(xiàng)，采用合適的分析方法將雜質(zhì)控制在可接受限度以內(nèi)。方法1 的控制方式可以根據(jù)ICH Q6A進(jìn)行定期確認(rèn)性檢測。如果在至少6 個(gè)連續(xù)的中試批次或3 個(gè)連續(xù)的生產(chǎn)批次中，原料藥中的致突變雜質(zhì)水平均低于可接受限度的30%，則可證明定期確認(rèn)性檢測是合理的。如果不滿足該條件，則建議作為原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的常規(guī)檢測項(xiàng)。方法2：在原料、起始物或中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中包含雜質(zhì)檢查項(xiàng)，或作為過程控制項(xiàng)，采用合適的分析方法將雜質(zhì)控制在可接受限度以內(nèi)。方法3：在原料、起始物料或中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對雜質(zhì)進(jìn)行檢測，或進(jìn)行過程控制，制訂一個(gè)高于原料藥中該雜質(zhì)可接受限度的標(biāo)準(zhǔn)，使用合適的分析方法并結(jié)合對雜質(zhì)去向和清除的認(rèn)知，及相關(guān)的工藝控制，保證原料藥中的雜質(zhì)的水平低于可接受限度而無需在后續(xù)工藝中再行檢測。對實(shí)驗(yàn)室規(guī)模試驗(yàn)（鼓勵(lì)采用摻雜實(shí)驗(yàn)）的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析（必要時(shí)可以采用中試規(guī)?；蛏虡I(yè)規(guī)模批次數(shù)據(jù)加以佐證），如果原料藥中雜質(zhì)水平低于可接受限度的30%，則采用該方法是合適的。方法4：明確工藝參數(shù)及其對殘留雜質(zhì)水平（包括去向和清除知識）的影響，確信原料藥中的雜質(zhì)水平將會低于可接受限度，則建議無需對該雜質(zhì)進(jìn)行分析檢測（即不需要將雜質(zhì)訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中）。方法4 特別適用于那些自身不穩(wěn)定的雜質(zhì)（例如，與水迅速完全反應(yīng)的二氯亞砜），或那些在合成路線早期引入并可被有效清除的雜質(zhì)。
2.8 文件
文件部分有2 個(gè)問答。
問題1（問答文件9.1）：如果（Q）SAR 預(yù)測是在藥物開發(fā)過程中開展的，是否應(yīng)在上市申請中重復(fù)這些預(yù)測？回答：用于針對ICH M7 的（Q）SAR模型通常會定期更新，更新內(nèi)容包含新的細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)數(shù)據(jù)和更精準(zhǔn)的警示結(jié)構(gòu)。申請人無需在藥物開發(fā)過程中更新其（Q）SAR 評估，除非存在安全性擔(dān)憂，例如新獲得的細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)數(shù)據(jù)和/或機(jī)制知識表明預(yù)測不正確。例如，在有理由質(zhì)疑陰性預(yù)測結(jié)果的情況下（如存在芳香胺，但模型給出了陰性預(yù)測結(jié)果），建議進(jìn)行重新評估。建議申請人在首次上市申請之前再次運(yùn)行（Q）SAR 預(yù)測，以確保預(yù)測能夠反映最新的可用數(shù)據(jù)。如果之后在其他監(jiān)管轄區(qū)提交了上市申請，則可能需考慮進(jìn)行重新評估。如果最初全球上市申請時(shí)的預(yù)測未使用最新版本的軟件，也可能需要重新評估?？傮w而言，使用在2014 年ICH M7 發(fā)布之前開發(fā)的模型生成的預(yù)測結(jié)果被視為不可接受。
問題2（問答文件9.2）：對于上市申請，哪些內(nèi)容和通用技術(shù)文檔（CTD）放置建議可以提高ICHM7 風(fēng)險(xiǎn)評估和控制策略的清晰度？回答：在模塊2中，應(yīng)包括ICH M7 風(fēng)險(xiǎn)評估和控制策略的簡要總結(jié)（第2.3 節(jié)和第2.6 節(jié)）。在模塊3 中，應(yīng)詳細(xì)說明ICH M7 的風(fēng)險(xiǎn)評估和控制策略。按照ICH M4Q和相關(guān)問答文件的要求，此類信息建議放置在CTD文檔的相應(yīng)模塊（如3.2.S.3.2 雜質(zhì)或3.2.S.4.5 原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù)，以及3.2.P.5.5 雜質(zhì)表征或3.2.P.5.6 制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定依據(jù)）。建議使用ICH M7危害評估和ICH M7 雜質(zhì)控制策略的匯總表來提高清晰度。（1）對于ICH M7 危害評估表，建議的信息包括雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)、單獨(dú)的（Q）SAR 結(jié)果（陽性/陰性預(yù)測，超出應(yīng)用域）、細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)結(jié)果（陽性/陰性，如有）、ICH M7 雜質(zhì)類別（1～5）以及支持性信息［如細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)的信息/鏈接、文獻(xiàn)報(bào)告、（Q）SAR專家分析等］。還應(yīng)注明所使用的計(jì)算機(jī)系統(tǒng)（名稱、版本、終點(diǎn)）。（2）對于ICH M7 雜質(zhì)控制策略表，建議的信息包括雜質(zhì)來源（如引入的合成步驟、降解物等）、ICH M7 雜質(zhì)類別、清除因子（如測量值或預(yù)測值）、ICH M7 控制方法（1～4）、控制策略（即包括中間過程或化合物檢測原理）以及支持性信息（如合理性依據(jù)的信息/鏈接、計(jì)算）。還應(yīng)注明每日最大劑量、TTC 和擬定的治療期限。（3）此外，如果模塊3 和模塊4（包括毒性試驗(yàn)報(bào)告）使用不同的化合物命名規(guī)范，建議對化合物代號進(jìn)行交叉引用。
在模塊4 中，應(yīng)包括關(guān)于雜質(zhì)安全性試驗(yàn)相關(guān)的完整資料［如細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)報(bào)告、（Q）SAR報(bào)告、其他遺傳毒性試驗(yàn)報(bào)告、附加試驗(yàn)等］，以支持風(fēng)險(xiǎn)評估和控制策略。這些資料通常置于4.2.3.7.6節(jié)“雜質(zhì)”中（對于附加資料，參見ICH M4S），并且可以通過提供超鏈接與模塊3 交叉引用。
解讀：關(guān)于（Q）SAR預(yù)測，申請人會在藥物開發(fā)過程中開展，由于軟件會定期更新，建議在首次上市前再次運(yùn)行（Q）SAR 預(yù)測，以確保預(yù)測能夠反映最新的可用數(shù)據(jù)。如果最初全球上市申請時(shí)的預(yù)測未使用最新版本的軟件，在其他監(jiān)管結(jié)構(gòu)申報(bào)時(shí)也可能需要重新評估。建議在通用技術(shù)文檔（CTD）清晰地呈現(xiàn)M7 風(fēng)險(xiǎn)評估和控制策略相關(guān)的內(nèi)容，建議同時(shí)在藥學(xué)綜述2.3 和藥理毒理綜述2.6 簡要總結(jié)相關(guān)內(nèi)容，以便藥學(xué)和藥理毒理審評人員均可清晰地獲得該部分信息。更詳細(xì)的信息分別放在藥學(xué)的模塊3 中和非臨床的模塊4 中，模塊3中應(yīng)詳細(xì)說明ICH M7 的風(fēng)險(xiǎn)評估和控制策略，模塊4 中應(yīng)提供關(guān)于雜質(zhì)安全性試驗(yàn)相關(guān)的完整資料。
3、 非臨床審評關(guān)注點(diǎn)
對于致突變雜質(zhì)相關(guān)的審評，非臨床方面主要關(guān)注（Q）SAR 軟件及數(shù)據(jù)、致突變試驗(yàn)數(shù)據(jù)和相關(guān)文獻(xiàn)科學(xué)性等，下文就藥理毒理專業(yè)審評常見問題進(jìn)行分析。
3.1 （Q）SAR軟件預(yù)測關(guān)注點(diǎn)
（Q）SAR軟件預(yù)測對于致突變雜質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)評估非常關(guān)鍵，對于軟件預(yù)測結(jié)果的可靠性至關(guān)重要，因?yàn)? 種互補(bǔ)（Q）SAR軟件預(yù)測為陰性結(jié)果即可按一般雜質(zhì)控制，無需進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。如果軟件預(yù)測出假陰性結(jié)果，將增加藥品上市后安全性風(fēng)險(xiǎn)。因此，需要采用公認(rèn)、可靠的（Q）SAR軟件進(jìn)行預(yù)測。目前，美國食品藥品管理局（FDA）常用的基于統(tǒng)計(jì)學(xué)規(guī)則的軟件有CASE Ultra （MultiCASE，Inc.），Model Applier-Statistical Models（Leadscope，Inc.）和Sarah Nexus（Lhasa Limited），基于專家規(guī)則的軟件有CASE Ultra-Expert Alerts （MultiCASE，Inc.），Model Applier- Expert Alerts （Leadscope， Inc.） 和Derek Nexus（ Lhasa Limited）。這些軟件也是目前在國內(nèi)的注冊申請中常用軟件。對于非公認(rèn)、可靠的（Q）SAR軟件要謹(jǐn)慎，除非其采用的預(yù)測方法學(xué)能達(dá)到OECD 對（Q）SAR 驗(yàn)證的原則，且需提供符合要求的模型驗(yàn)證資料。以下為一個(gè)案例。
案例1：某品種，雜質(zhì)A，結(jié)構(gòu)內(nèi)含有警示片段，未對其進(jìn)行方法學(xué)研究，僅按未知單雜進(jìn)行控制。發(fā)補(bǔ)要求提出對可能的致突變雜質(zhì)進(jìn)行分析和研究。申請人分別采用基于統(tǒng)計(jì)算法的X 軟件和基于規(guī)則算法的Y軟件對基因毒性進(jìn)行了預(yù)測，結(jié)果判斷為該化合物基因毒性風(fēng)險(xiǎn)較低，不屬于致突變雜質(zhì)。經(jīng)查詢，Y軟件是由歐盟委員會聯(lián)合研究中心開發(fā)，向公眾免費(fèi)開放，用于化合物的分級和毒性預(yù)測的軟件，屬于基于專家規(guī)則的軟件。X軟件是由某公司開發(fā)的化合物預(yù)測軟件，可預(yù)測化合物的PK、毒性等性質(zhì)參數(shù)，毒性預(yù)測模塊中包含有基因毒性，包括染色體變異性和致突變性，屬于基于統(tǒng)計(jì)規(guī)則的軟件計(jì)算。均未查詢到以上軟件是否經(jīng)OECD 的驗(yàn)證原則進(jìn)行了驗(yàn)證。申報(bào)資料也未提供以上2 個(gè)軟件方法學(xué)驗(yàn)證報(bào)告，審評對于以上軟件預(yù)測結(jié)果不予認(rèn)可。
3.2 致突變試驗(yàn)關(guān)注點(diǎn)
用于確定雜質(zhì)致突變性的試驗(yàn)包括體外試驗(yàn)（Ames 試驗(yàn)）和適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)試驗(yàn)（表1）。根據(jù)ICH M7（R2）問答，體內(nèi)外試驗(yàn)和計(jì)算機(jī)預(yù)測結(jié)果的權(quán)重為體內(nèi)試驗(yàn)＞體外試驗(yàn)＞（Q）SAR，即Ames試驗(yàn)陰性結(jié)果可推翻（Q）SAR 預(yù)測的陽性結(jié)果，適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)試驗(yàn)陰性結(jié)果可提示Ames 試驗(yàn)陽性結(jié)果的體內(nèi)相關(guān)性小。ICH M7（R2）注釋2 中說明：為了評估雜質(zhì)的潛在致突變性，進(jìn)行一個(gè)Ames 試驗(yàn)，該試驗(yàn)需根據(jù)ICHS2（R1）和OECD471 指導(dǎo)原則制定全面充分的試驗(yàn)方案并進(jìn)行。試驗(yàn)需遵循GLP 規(guī)范；但是，不完全遵循GLP 并不一定意味著所得數(shù)據(jù)不能用于支持臨床試驗(yàn)和上市許可。不符合遵循GLP 的偏差應(yīng)在試驗(yàn)報(bào)告中進(jìn)行描述。例如，試驗(yàn)樣品的制備和分析可能不遵循GLP 要求。在某些情況下，檢測用細(xì)菌菌株可能會被限制在那些經(jīng)證明對已鑒定的對警示結(jié)構(gòu)敏感的菌株之中。對于分離或合成不可行的雜質(zhì)，或化合物數(shù)量有限的雜質(zhì)，可能無法達(dá)到目前試驗(yàn)指導(dǎo)原則所推薦的符合ICH要求的Ames 試驗(yàn)的最高試驗(yàn)濃度。這種情況下，Ames 試驗(yàn)可以采用迷你化試驗(yàn)（mini-Ames試驗(yàn)），并證實(shí)該方法與符合ICH的試驗(yàn)高度一致，以使得能在更高的濃度下進(jìn)行試驗(yàn)以符合要求。
對于用于確定雜質(zhì)致突變性的Ames 試驗(yàn)，審評中常見的問題主要有：（1）由試驗(yàn)申請人自己進(jìn)行，非GLP 試驗(yàn)；（2）Ames 試驗(yàn)雖在GLP 認(rèn)證機(jī)構(gòu)進(jìn)行，但是未在GLP 條件下進(jìn)行；（3）試驗(yàn)方法學(xué)不規(guī)范。（4）采用mini-Ames 試驗(yàn)，且該試驗(yàn)遠(yuǎn)達(dá)不到評價(jià)的要求；雖然指導(dǎo)原則說明了不完全是GLP 條件下進(jìn)行的試驗(yàn)以及在特殊條件下進(jìn)行的mini-Ames 試驗(yàn)也可能被接受，但是根據(jù)指導(dǎo)原則注釋2描述，需要具體問題具體分析。結(jié)合當(dāng)前的試驗(yàn)現(xiàn)狀，mini-Ames 試驗(yàn)作為未被公認(rèn)或未經(jīng)過充分驗(yàn)證的方法，將其作為排除致突變性的一項(xiàng)關(guān)鍵試驗(yàn)存在假陰性風(fēng)險(xiǎn)，而 Ames 試驗(yàn)時(shí)間成本和資金成本均不高，除非極為特殊的情況（如注釋2 中所述特殊情況，且已努力進(jìn)行過分離或合成卻證明不可行），需進(jìn)行GLP 條件下的Ames 試驗(yàn)且方法學(xué)必須符合ICH S2 的要求。舉例如下：
案例2：某品種，雜質(zhì)B和雜質(zhì)C，根據(jù)Derek 和Sarah 軟件預(yù)測，含有警示結(jié)構(gòu)，分類為3 類。對雜質(zhì)B 和雜質(zhì)C 進(jìn)行了GLP 條件下的Ames 試驗(yàn)，其試驗(yàn)結(jié)果均為陰性，擬按一般雜質(zhì)進(jìn)行控制。具體試驗(yàn)中，采用了5 種菌株（TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535）進(jìn)行試驗(yàn)。雜質(zhì)B：在代謝或非代謝活化條件下，在每皿1.85～150 μg 濃度范圍內(nèi)，結(jié)果為陰性。雜質(zhì)C：代謝或非代謝活化條件下，在每皿0.49～40 μg 濃度范圍內(nèi)，結(jié)果為陰性。Ames 試驗(yàn)要求受試物的最高濃度主要取決于受試物對細(xì)菌的毒性和/或溶解度，可溶性、有細(xì)胞毒性化合物應(yīng)根據(jù)細(xì)胞毒性情況確定最高濃度，進(jìn)行評分的濃度應(yīng)顯示出明顯的細(xì)胞毒性，細(xì)胞毒性通過回復(fù)突變菌落數(shù)目的減少，和（或）背景菌苔的消失或減少來檢測。而該2 項(xiàng)試驗(yàn)中濃度僅依據(jù)TA100 菌株的細(xì)菌濃度來設(shè)計(jì)正式試驗(yàn)的檢測濃度。雜質(zhì)B：正式試驗(yàn)中，在評分的高濃度下對5 種菌株均顯示出明顯的細(xì)胞毒性，故其試驗(yàn)結(jié)果可接受。雜質(zhì)C：預(yù)試驗(yàn)中，對于TA100 菌株在每皿78.13 μg 及以上濃度時(shí)顯示有細(xì)菌毒性，在每皿39.13 μg 濃度時(shí)未顯示細(xì)菌毒性，在正式試驗(yàn)對5 種菌株均選擇每皿40 μg 濃度作為最高濃度。但是，正式試驗(yàn)中在該濃度下僅對TA97 有弱的細(xì)菌毒性，其余4 個(gè)菌株均未見細(xì)胞毒性，因細(xì)胞毒性未達(dá)到方法學(xué)的要求，因此不認(rèn)可該試驗(yàn)陰性的結(jié)論。
ICH M7 提出了若一個(gè)雜質(zhì)在Ames 試驗(yàn)呈陽性結(jié)果且該雜質(zhì)水平無法控制在適當(dāng)?shù)目山邮芟薅葍?nèi)時(shí)可追加一個(gè)合適的體內(nèi)試驗(yàn)以提示該Ames試驗(yàn)無體內(nèi)相關(guān)性的研究思路。但是，從業(yè)界開發(fā)經(jīng)驗(yàn)來說，可能一個(gè)雜質(zhì)在Ames 試驗(yàn)呈陽性結(jié)果，采用的最主要措施是通過藥學(xué)來控制其限度使其符合要求，而非追加一個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)。另外，雖然M7注釋3 中列出了適用于不同Ames 試驗(yàn)陽性結(jié)果情況的體內(nèi)追加試驗(yàn)，但是從國內(nèi)GLP 機(jī)構(gòu)經(jīng)過驗(yàn)證的遺傳毒性試驗(yàn)情況看，轉(zhuǎn)基因突變試驗(yàn)可能在國內(nèi)尚無法開展，Pig-a 試驗(yàn)、大鼠肝臟程序外NDA合成試驗(yàn)、彗星試驗(yàn)進(jìn)行較少，大多數(shù)機(jī)構(gòu)未進(jìn)行過充分的驗(yàn)證。作為以一個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)來排除Ames 試驗(yàn)陽性結(jié)果提示的擔(dān)憂，需要強(qiáng)有力的試驗(yàn)依據(jù)支持。為適應(yīng)藥物遺傳毒性評價(jià)的需求，有能力的GLP 機(jī)構(gòu)可以考慮建立和充分驗(yàn)證相關(guān)的體內(nèi)試驗(yàn)，若屬于國內(nèi)均未建立的方法，則可考慮進(jìn)行方法學(xué)聯(lián)合驗(yàn)證。
4、 結(jié)語
ICH M7 明確了致突變雜質(zhì)的鑒別方法，對致突變雜質(zhì)進(jìn)行了分類，并提出了相應(yīng)的控制策略和監(jiān)管理念，目的是限制致突變雜質(zhì)的潛在致癌風(fēng)險(xiǎn)。ICH M7（R2）問答旨在為ICH M7 提供更加明確的解釋和說明，任何指導(dǎo)原則都不是法規(guī)、更不是教條，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，監(jiān)管理念的更新和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累，指導(dǎo)原則將更新和完善。目前M7（R2）指導(dǎo)原則正文、問答及附錄已在我國正式實(shí)施。
在藥品全生命周期中，藥品上市許可持有人作為責(zé)任主體，對藥品的安全性和提交給監(jiān)管機(jī)構(gòu)的所有數(shù)據(jù)的真實(shí)性、完整性和可靠性承擔(dān)主體責(zé)任，其中，用于支持預(yù)測致突變雜質(zhì)的軟件應(yīng)得到監(jiān)管機(jī)構(gòu)認(rèn)可，支持性試驗(yàn)應(yīng)規(guī)范，支持限度制定、毒性評估報(bào)告的數(shù)據(jù)源應(yīng)穩(wěn)健。在藥品全生命周期中，藥品上市許可持有人和監(jiān)管機(jī)構(gòu)需參考ICHM7 的理念和方法，以控制藥品致突變雜質(zhì)的潛在致癌性風(fēng)險(xiǎn)，保護(hù)和促進(jìn)公眾健康。
參考文獻(xiàn)
[1] ICH Q3A(R2). Impurities in new drug substance s[EB/OL]. (2006-10-25)[2024-08-17]. https://database.ich.org/sites/default/files/Q3A%28R2%29%20Guideline.pdf.
[2] ICH Q3B(R2). Impurities in new drug products [EB/OL].(2006-06-02) [2024-08-17]. https://database. ich. org/sites/default/files/Q3B%28R2%29%20Concept%20Paper.pdf.
[3] ICH M7(R2). Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk [EB/OL].(2023-04-03)[2024-08-17]. https://database. ich. org/sites/default/files/ICH_M7%28R2%29_Guideline_Step4_2023_0216_0.pdf.
[4] ICH. M3(R2). Guidance on nonclinical safety studies for the conduct of human clinical trials and marketing authorization for pharmaceuticals [EB/OL]. (2009-06-11)[2024-08-17]. https://database. ich. org/sites/default/files/M3_R2__Guideline.pdf.
[5] ICH M7 (R2) Q&As. Questions & Answers: ICH M7 (R2) Guideline: Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk [EB/OL]. (2022-05-24)[2024-08-17]. https://database. ich. org/sites/default/files/M3_R2__Guideline.pdf.
[6] 國家藥品監(jiān)督管理局. 國家藥監(jiān)局關(guān)于適用«M7(R2):評估和控制藥物中DNA反應(yīng)性(致突變)雜質(zhì)以限制潛在致癌風(fēng)險(xiǎn)»國際人用藥品注冊技術(shù)協(xié)調(diào)會指導(dǎo)原則的公告(2024 年第1 號)[EB/OL]. (2024-01-05)[2024-08-17]. https://www. nmpa. gov. cn/xxgk/ggtg/ypggtg/ ypqtggtg/20240105155616198.html. National Medical Products Administration. Announcement of the National Medical Products Administration on the Application of the Guiding Principles of the International Technical Coordination Committee for the Registration of Drugs for Human Use on the Evaluation and Control of DNA Reactive (Mutative) Impurities in Drugs to Limit Potential Carcinogenic Risks (M7 (R2)) (No. 1 of 2024) [EB/OL] (2024-01-05) [2024-08-17]. https://www. nmpa. gov. cn/ xxgk/ggtg/ypggtg/ypqtggtg/20240105155616198.html.
[7] OECD. Guidance documenton the validation of (Quantitative) Structure-Activity Relationships[(Q)SAR]models. [EB/OL]. (2007-02-15) [2024-08-17]. https://www. oecd. org/en/publications/guidance-document-onthe-validation-of-quantitative-structure-activityrelationship-q-sar-models_9789264085442-en. html
[8] OECD. (Q)SAR Model Reporting Format (QMRF) [EB/ OL]. (2017-6-30) [2024-08-17] https://publications.jrc.ec. europa. eu/repository/bitstream/JRC107491/kjna28713 enn.pdf.
[9] Amberg A,Andaya R V,Anger L T, et al. Principles and procedures for handling out-of-domain and indeterminate results as part of ICH M7 recommended (Q)SAR analyses [J]. Regul Toxicol Pharmacol, 2019,102: 53-64.
[10] Teasdale A, Elder D, Chang S J, et al. Risk assessment of genotoxic impurities in new chemical entities: Strategies to demonstrate control [J]. Org Process Res Dev, 2013, 17(2): 221-230.
[11] Barber C,Antonucci V,Baumann J C et al. A consortiumdriven framework to guide the implementation of ICH M7 Option 4 control strategies [J]. Regul Toxicol Pharmacol, 2017, 90: 22-28.
內(nèi)容來源：藥物評價(jià)研究 2024年12月 第47卷
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